項目名稱：Nexiguran ziclumeran（Nex-z，NTLA-2001）

適應(yīng)癥：

ATTR淀粉樣變性伴心肌?。ˋTTR-CM）

遺傳性ATTR淀粉樣變性伴多發(fā)性神經(jīng)病變（ATTRv-PN）

項目簡介：Nex-z由Intellia與Regeneron Pharmaceuticals，Inc.合作開發(fā)和商業(yè)化。Nex-z是一種基于CRISPR/Cas9技術(shù)的在研體內(nèi)基因敲除療法。其設(shè)計核心為通過LNP靶向遞送系統(tǒng)，實現(xiàn)肝細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白（TTR）基因的功能性失活，從源頭阻斷病理性TTR蛋白的合成。該療法的關(guān)鍵優(yōu)勢在于單次給藥實現(xiàn)TTR蛋白長期抑制，為TTR疾病進(jìn)程的阻斷與逆轉(zhuǎn)提供創(chuàng)新治療策略。

市場評估：全球患病率25萬至50萬人，預(yù)計到2028年全球銷售額將達(dá)到120億美元。

項目進(jìn)展：Intellia 預(yù)計將在2025年下半年的Ⅰ期研究中提供ATTR-CM患者的臨床療效和安全性的長期數(shù)據(jù)；ATTR-CM入組于2027年初完成；ATTRv-PN BLA提交計劃在2028年進(jìn)行。

治療概念和作用機制：

利用脂質(zhì)納米顆粒（LNP）向肝臟輸送由兩部分組成的基因編輯系統(tǒng)：靶向TTR基因的特異性sgRNA和編碼Cas9酶的mRNA。LNP進(jìn)入體內(nèi)會被肝細(xì)胞表面表達(dá)的低密度脂蛋白（LDL）受體攝取，繼而發(fā)生胞吞作用并形成內(nèi)體。LNP分解并破壞內(nèi)體膜后，活性成分釋放至細(xì)胞質(zhì)。Cas9 mRNA分子通過天然核糖體翻譯過程，產(chǎn)生Cas9內(nèi)切核酸酶。TTR特異性sgRNA與Cas9內(nèi)切酶結(jié)合，形成核糖核蛋白復(fù)合體并轉(zhuǎn)運至細(xì)胞核。sgRNA通過序列互補識別TTR基因的特定靶序列并引導(dǎo)Cas9定位，Cas9通過切割靶位點雙鏈DNA產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂（DSB）。雙鏈斷裂修復(fù)中的非同源末端連接（NHEJ）途徑會在斷裂位點引入堿基水平的微小插入/缺失突變（indels），由此引發(fā)移碼突變導(dǎo)致TTR基因敲除，最終表現(xiàn)為TTR蛋白表達(dá)水平下降。

相關(guān)專利：

①WO2017173054A1（《LIPID NANOPARTICLE FORMULATIONS FOR CRISPR/CAS COMPONENTS》要求保護(hù)LNP組合物，包含編碼cas核酸酶的mRNA、guide RNA和可電離脂質(zhì)，同時限定了脂質(zhì)組分的配比）。

② WO2019067872A1（《COMPOSITIONS AND METHODS FOR TTR GENE EDITING AND TREATING ATTR AMYLOIDOSIS》要求保護(hù)TTR基因編輯的組合物及方法，限定了sgRNA的序列和/或化學(xué)修飾。）

臨床試驗：

①NCT04601051：Phase 1 Two-Part (Open-label, Single Ascending Dose (Part 1) and Open-label, Single Dose Expansion (Part 2)) Study to Evaluate Safety, Tolerability, Pharmacokinetics, and Pharmacodynamics of NTLA-2001 in Patients With Hereditary Transthyretin Amyloidosis With Polyneuropathy (ATTRv-PN) and Patients With Transthyretin Amyloidosis-Related Cardiomyopathy (ATTR-CM)（進(jìn)行中）

②NCT06128629：MAGNITUDE: A Phase 3, Multinational, Multicenter, Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Study to Evaluate the Efficacy and Safety of NTLA-2001 in Participants With Transthyretin Amyloidosis With Cardiomyopathy (ATTR-CM)（招募中）

③NCT06672237：MAGNITUDE-2: A Phase 3, Multinational, Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Study to Evaluate the Efficacy and Safety of NTLA-2001 in Participants With Hereditary Transthyretin Amyloidosis With Polyneuropathy (ATTRv-PN)（招募中）

項目名稱：Lonvoguran ziclumeran（Lonvo-z，NTLA-2002）

適應(yīng)癥：遺傳性血管性水腫（HAE）

項目簡介：Lonvo-z是Intellia自主開發(fā)的體內(nèi)CRISPR 基因編輯療法，設(shè)計目標(biāo)為通過LNP 靶向肝臟，實現(xiàn)KLKB1基因功能性敲除；其核心創(chuàng)新點在于單次給藥潛在實現(xiàn) HAE 發(fā)作的終生控制，從機制上解決HAE患者需長期頻繁給藥的臨床痛點。

市場評估：全球患病率約15萬人，預(yù)計到2028年全球銷售額將達(dá)到50億美元。

項目進(jìn)展：Intellia 預(yù)計將在2025年下半年提供正在進(jìn)行的1/2期研究的更多數(shù)據(jù)，有望在 2026 年下半年提交生物制品許可申請（BLA）。

治療概念和作用機制：

構(gòu)建編碼Cas9核酸酶的mRNA與靶向KLKB1基因的sgRNA的共遞送體系，以LNP為載體實現(xiàn)二者的高效包載后，對遺傳性血管性水腫（HAE）患者進(jìn)行體內(nèi)給藥。該LNP 系統(tǒng)具備肝臟靶向性，可精準(zhǔn)富集于激肽釋放酶的主要合成部位 —— 肝臟。肝細(xì)胞攝取LNP后，LNP 發(fā)生內(nèi)涵體逃逸并釋放內(nèi)容物，其中Cas9 mRNA在胞質(zhì)核糖體上完成翻譯生成Cas9蛋白，與sgRNA組裝形成核糖核蛋白復(fù)合物并轉(zhuǎn)運至細(xì)胞核。sgRNA通過序列互補識別KLKB1基因的特定靶序列并引導(dǎo)Cas9定位，Cas9通過切割靶位點雙鏈DNA產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂（DSB）。雙鏈斷裂修復(fù)中的非同源末端連接（NHEJ）途徑會在斷裂位點引入堿基水平的微小插入/缺失突變（indels），由此引發(fā)移碼突變導(dǎo)致KLKB1基因敲除，最終表現(xiàn)為激肽釋放酶水平下降。

相關(guān)專利：

① WO2024011206A1（《METHODS FOR IN VIVO EDITING OF KLKB1》描述了通過全身施用LNP組合物來體內(nèi)編輯肝臟KLKB1基因的方法，所述LNP組合物包含編碼Cas9核酸酶的mRNA和靶向該基因的sgRNA。）。

② WO2021158858A1（《COMPOSITIONS AND METHODS FOR KALLIKREIN ( KLKB1) GENE EDITING》要求保護(hù)KLKB1基因編輯的組合物及方法，限定了sgRNA的序列和/或化學(xué)修飾。）

臨床試驗：

①NCT06634420：HAELO: A Phase 3, Multinational, Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Study to Evaluate the Efficacy and Safety of NTLA-2002 in Participants With Hereditary Angioedema (HAE) （進(jìn)行中）

② NCT06262399：Long-Term Follow-Up of Subjects Treated With NTLA 2002 （進(jìn)行中）

③NCT05120830：Phase1/2 Study to Evaluate Safety, Tolerability, Pharmacokinetics, and Pharmacodynamics of NTLA-2002 in Adults With Hereditary Angioedema (HAE) （進(jìn)行中）

2018 年Intellia Therapeutics團(tuán)隊發(fā)表《A Single Administration of CRISPR/Cas9 Lipid Nanoparticles Achieves Robust and Persistent In Vivo Genome Editing》的研究成果，介紹了一種基于LNP的遞送系統(tǒng)“LNP-INT01”【脂質(zhì)處方：LP01脂質(zhì)、膽固醇、DSPC和PEG2k-DMG（摩爾比-45：44：9：2）】。通過該處方實現(xiàn)Cas9 mRNA與sgRNA的高效共遞送，在單次全身給藥后即可達(dá)到具有治療意義的體內(nèi)基因編輯水平，且編輯效果具備持久性。該遞送系統(tǒng)具有優(yōu)化的引導(dǎo)序列、特定的sgRNA化學(xué)修飾模式、重復(fù)給藥能力和可生物降解的可電離脂質(zhì)，滿足CRISPR/Cas9遞送系統(tǒng)所需的所有標(biāo)準(zhǔn)，為肝臟相關(guān)遺傳性疾病的基因治療提供臨床可行的遞送解決方案，也為Nex-z與Lonvo-z的開發(fā)奠定核心技術(shù)基礎(chǔ)。